NCI-H446 H446 (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

NCI-H446 H446 (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

種屬人

年齡（性別）男；61歲

組織來源肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細(xì)胞肺癌

生長(zhǎng)特性貼壁/懸浮

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述：背景描述NCI-H446細(xì)胞是從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。NCI-H446細(xì)胞是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細(xì)胞內(nèi)脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平。C-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍，c-myc RNA比正常細(xì)胞增加15倍。最初，傳代培養(yǎng)基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/m??

生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠(Coisol)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Coisol ELISA Kit

People of low molecular weight protein 7/ proteasome beta type 9 (LMP7/PSMB9) ELISA Kit 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)檢測(cè)試劑盒

MonkeyCollagenaseIELISAKit膠原酶I(CollagenaseI)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBJP(HumanBence-Jonesprotein)ELISAKit人本周蛋白

細(xì)菌尿脫羧酶檢測(cè)試劑盒20次

Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FCN1重組人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 蛋白 Protein

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)

HA重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CDH12 Protein Human 重組人 Cadherin-12 / CDH12 蛋白

FABI Protein E. coli 重組大腸桿菌 Enoyl-ACP Reductase / FABI 蛋白

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CDH12 Protein Human 重組人 Cadherin-12 / CDH12 蛋白

FCN1重組人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 蛋白 Protein

FABI Protein E. coli 重組大腸桿菌 Enoyl-ACP Reductase / FABI 蛋白

HA重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

NCI-H446 H446 (人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Human lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測(cè)試劑盒

Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenImmunoglobulinE,IgE檢測(cè)試劑盒雞免疫球蛋白E(IgE)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠新生甲狀腺素檢測(cè)試劑盒   小鼠新生甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠新生甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素檢測(cè)試劑盒   小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒、小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠心肌肌鈣蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒、小鼠心肌肌鈣蛋白檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體檢測(cè)試劑盒   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒、小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。