DB (彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)

商品屬性

商品介紹

年齡（性別） 45歲

組織來源 腹水

生長特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋ 10% FBS＋ 1% P/S

推薦傳代比例 2×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~50小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

注意事項 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請注意離心收集細(xì)胞懸液；請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)檢測試劑盒 ，英文名： CKMB ELISA Kit

Mouse tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 小鼠組織多肽抗原(TPA)檢測試劑盒

RatCalretinin,CRELISAKit 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFVIIIAg(MouseFactorVIII-relatedAigen)ELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原

細(xì)胞抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20次

Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原

WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein

COL4A3BP Protein Human 重組人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SPN Protein Mouse 重組小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原

COL4A3BP Protein Human 重組人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

SPN Protein Mouse 重組小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein

DB (彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)小鼠神經(jīng)降壓肽()檢測試劑盒 96T/48T

Human membrane attack complex (MAC) ELISA Kit 人膜攻擊復(fù)合物(MAC)檢測試劑盒

HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL-C)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP檢測試劑盒山羊生長激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit小鼠Ⅹ(FⅩ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠前列腺素E2   英文名稱：   prostaglandin E2   規(guī)格：      英文縮寫：   PGE2

小鼠分泌型0脂酶A2   英文名稱：   secretary phospholipase A2   規(guī)格：      英文縮寫：   sPLA2

小鼠多效生長因子   英文名稱：   Pleioophin   規(guī)格：      英文縮寫：   PTN

小鼠抑癌基因P53蛋白   英文名稱：   aioncogene p53 protein   規(guī)格：      英文縮寫：   P53

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。