Pt K1 NBL-3 (袋鼠腎細(xì)胞)

Pt K1 NBL-3 (袋鼠腎細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

種屬 長(zhǎng)鼻袋鼠

年齡（性別） 雌性，成年

組織來源 腎

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：Pt K1(NBL-3)細(xì)胞株是K·H·Walen在1962年從表觀正常的有袋大鼠的腎建立的。免疫過氧化物染色顯示，Pt K1(NBL-3)細(xì)胞角蛋白陽性。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠0脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： GPC3 ELISA Kit

Mouse acetylcholine (ACH) ELISA Kit 小鼠乙酰(ACH)檢測(cè)試劑盒

RatEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 大鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGCK(Humanglucokinase)ELISAKit人葡萄糖激酶

細(xì)胞(GLATHIONE)總濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒50次

RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD24重組大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease 0.5mgGAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-0酸甘油醛脫氫酶(抗原)

ROBO4重組人 ROBO4 蛋白 Protein

IFI30 Protein Human 重組人 IFI30 蛋白

IL2RG Protein Mouse 重組小鼠 IL2RG / CD132 蛋白

GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease 0.5mgGAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-0酸甘油醛脫氫酶(抗原)

IFI30 Protein Human 重組人 IFI30 蛋白

CD24重組大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL2RG Protein Mouse 重組小鼠 IL2RG / CD132 蛋白

ROBO4重組人 ROBO4 蛋白 Protein

Pt K1 NBL-3 (袋鼠腎細(xì)胞)小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cytochrome P4502E1 (CYP2E1) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)檢測(cè)試劑盒

HumanLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 人黃體生成素釋放激素(LHRH)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanComplemefragme3c,C3c檢測(cè)試劑盒人補(bǔ)體片段3c(C3c)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CASEINKINASE1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanProthrombin，PTELISAKit人原(PT)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T