小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF品牌

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細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF品牌
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 取孕9天的65小鼠胚胎，去除腦、心臟等培養(yǎng)建立。該細(xì)胞可用作飼養(yǎng)層細(xì)胞，支持胚胎干細(xì)胞ES的生長并維持ES未分化的狀態(tài)。當(dāng)作為飼養(yǎng)層細(xì)胞時，MEF需經(jīng)絲裂霉C處理停止生長。建議作為ES細(xì)胞的飼養(yǎng)層時，MEF不要超過6代。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-2 4.5g/Liter Glucose) 0%CS

傳代方法 :3傳代；3~4天次。

傳代情況 P

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

培養(yǎng)步驟：
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF品牌對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
. 接收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF品牌，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 ?

常春藤苷C CAS 426-03-6 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;5mg/支

3-吲哚 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 0mg

DL-蘋果酸 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 00mg

反二酸(富馬酸) CAS 0-7-8 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

原人參三醇 CAS 34080-08-5 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

黃芪皂苷III CAS 84687-42-3 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,0mg/支

瓜子金皂苷己 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

衛(wèi)矛醇;Dulcitol CAS 608-66-2 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

沒食子兒茶素沒食子酸酯; (-)-Gal CAS 4233-96-9 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

3,29-二苯甲酰基栝樓仁三醇;3,29 CAS 87300-54-8 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

杠柳苷 CAS 337-64-9 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

5（B5）;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品 CAS 37-08-6 訂購|咨詢  規(guī)格： 0.g

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF品牌LRRC59  LRRC59蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

WT-/Wilms Tumor Protein  母細(xì)胞瘤蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

LIFR/CD8  白病抑制因子受體抗體 規(guī)格: 0.mlGGCX  γ-谷氨酰羧化酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.mlMouse Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.ml

CD4  CD4抗體 規(guī)格: 0.ml

SLC26A4  鈉單獨轉(zhuǎn)運蛋白SLC26A4抗體 規(guī)格: 0.ml

BAFF/CD257  TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/APC  APC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.ml

C3orf2/XXYLT  3號染色體開放閱讀框2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Dab (Tyr220)  磷酸化Disabled 抗體 規(guī)格: 0.ml

PTPIP5/FAM82A2  蛋白磷酸酶相互作用蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml