大鼠表皮組織提取物說明書

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大鼠表皮組織提取物【Skin: Normal Rat Epidermal Derivatives】
     大鼠表皮組織提取物說明書表皮組織是由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠表皮組織中高質量的總RNA，PCR準備的*條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證產品的質量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。
培養步驟：
大鼠表皮組織提取物說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

兔抗SLC25A2多克隆抗體 英文名：Anti-SLC25A2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗PRX4多克隆抗體 英文名：Anti-PRX4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗NPHS多克隆抗體 英文名：Anti-NPHS rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗RBFOX3多克隆抗體 英文名：Anti-RBFOX3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗NCAN多克隆抗體 英文名：Anti-NCAN rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗ABCB4多克隆抗體 英文名：Anti-ABCB4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AAMTS2多克隆抗體 英文名：Anti-AAMTS2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AAMTS3多克隆抗體 英文名：Anti-AAMTS3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗AAMTS9多克隆抗體 英文名：Anti-AAMTS9 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃）

兔抗AGAP4多克隆抗體 英文名：Anti-AGAP4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AGL多克隆抗體 英文名：Anti-AGL rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗GANAB多克隆抗體 英文名：Anti-GANAB rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

大鼠表皮組織提取物說明書標準品　　　英文名稱Benzocaine　　　規格　：500mg　　CAS:34584　　進口、國產

甲酸標準品　　　英文名稱Benzoic Acid　　　規格　：300mg　　CAS:65-85-0　　進口、國產

苯佐那酯標準品　　　英文名稱Benzonatate　　　規格　：g　　CAS:04-3-4　　進口、國產

苯并噻二嗪相關物質A標準品　　　英文名稱　　　規格　：00mg　　CAS:2-30-2　　進口、國產

，4-苯醌標準品　　　英文名稱,4-Benzoquinone　　　規格　：200mg　　CAS:06-5-4　　進口、國產

鹽酸芐非明標準品　　　英文名稱　　　規格　：200mg　　CAS:54-22-3　　進口、國產

甲磺酰苯扎標準品　　　英文名稱Benztropine Mesylate　　　規格　：200mg　　CAS:32-7-2　　進口、國產

甲醇標準品　　　英文名稱Benzyl Alcohol　　　規格　：500mg　　CAS:00-5-6　　進口、國產

甲酸芐酯標準品　　　英文名稱Benzyl Benzoate　　　規格　：5g　　CAS:20-5-4　　進口、國產

-芐基-3-甲基-5-氨基吡唑鹽酸鹽標準品

　　　英文名稱　　　規格　：25mg　　CAS:　　進口、國產

羥萘芐芬寧標準品　　　英文名稱Bephenium Hydroxynaphthoate　　　規格　：500mg　　CAS:388-50-6　　進口、國產

標準品　　　英文名稱Berberine Chloride　　　規格　：50mg　　CAS:633-65-8　　進口、國產

beta-胡蘿卜素標準品　　　英文名稱　　　規格　：ea　　CAS:　　進口、國產

注意事項：
. 接收到大鼠表皮組織提取物說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。