人肺大靜脈組織提取物培養

注意事項：
. 接收到人肺大靜脈組織提取物培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

公司向您人肺大靜脈組織提取物培養的詳細說明：了解更多原代組織提取物點擊進

人肺大靜脈組織提取物【Lung: Normal Human Lung Vein Derivatives】
     人肺大靜脈組織提取物培養肺位于胸腔內，主要包含內皮，上皮，成纖維三種細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人肺大靜脈組織中高質量的總RNA，PCR準備的*條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證產品的質量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。?

兔抗SKI多克隆抗體 英文名：Anti-SKI rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗CALCA多克隆抗體 英文名：Anti-CALCA rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗CTGF多克隆抗體 英文名：Anti-CTGF rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗CTLA4多克隆抗體 英文名：Anti-CTLA4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗CUL4A多克隆抗體 英文名：Anti-CUL4A rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗GJC2多克隆抗體 英文名：Anti-GJC2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗Gjc3多克隆抗體 英文名：Anti-Gjc3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MIP多克隆抗體 英文名：Anti-MIP rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AQP多克隆抗體 英文名：Anti-AQP rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AQP4多克隆抗體 英文名：Anti-AQP4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AQP8多克隆抗體 英文名：Anti-AQP8 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗AQP0多克隆抗體 英文名：Anti-AQP0 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

人肺大靜脈組織提取物培養Quinine 奎寧 30-95-0  20mg

Ursolic acid 熊果酸 77-52-  20mg

Neoagarohexaose 新瓊六糖 25023-93-2  0mg

Methylene Blue (次甲藍)(美蘭) 25g  瓶

Honokiol 和厚樸酚 35354-74-6  20mg

DEAE Sephadex A-50 25g  瓶

5-O-Methylvisammioside 5-O-甲維斯阿米醇苷 84272-85-5  20mg

Ampicillin 氨芐 g  瓶

彩虹245plus廣譜蛋白Marker（5-245KD) 2×250ul  包

β-Estradiol β- 雌二醇 g  瓶

DeoxyribonueleaseⅠ DNase I(牛胰) (進口) 5ku  瓶

培養步驟：
人肺大靜脈組織提取物培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。