大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)

大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Bone Joint: PrimacellTM：Normal Synovial Cell】
  大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)大鼠滑膜細(xì)胞分離自正常大鼠滑膜組織，滑膜細(xì)胞主要功能：（）滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān)。（2）滑膜細(xì)胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長(zhǎng)，并且分泌大量的效應(yīng)分子來(lái)促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞。（3）是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。 雖然滑膜組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的滑膜組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的滑膜組織片能使得滑膜組織中成滑膜細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成滑膜細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成滑膜細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成滑膜原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成滑膜組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠滑膜細(xì)胞組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）大鼠滑膜細(xì)胞組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）大鼠滑膜細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

木生條孢牛肝菌 Boletellus emodensis

彈性蛋白酶(含00mL酶解緩沖液)0mL

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

人腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

醋酸鈣不動(dòng)桿菌 Acinetobacter calcoaceticus

TE-3(人食管細(xì)胞)5×06cells/瓶×2

V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×06cells/瓶×2

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)氟啉分子式：37.406英文名稱：Fu Malan：2867-47-9分子量： C2H22FNO4

4,5-二氮芴-9-酮(DAFO)英文名稱：4,5- two -9- (DAFO) n fluorene ketone分子式：82.8分子量： CH6N2O：50890-67-0

百秋里英文名稱：Patchouli alcohol分子式：分子量：：

十三英文名稱：Thirteen acid分子式：24.34分子量： C3H26O2：638-53-9

二芐分子式：208.26英文名稱：Two benzyl hydrazine：588-68-分子量： C4H2N2

丙五氟分子式：208.3英文名稱：Allyl - five：736-60-3分子量： C9H5F5

硝酸錳分子式：25.0英文名稱：Manganese nitrate：20694-39-7分子量： Mn(NO3)2.4H2O

2-甲吡分子式：93.3英文名稱：2- methyl pyridine：09-06-8分子量： C6H7N

2-硝-3-甲吡分子式：38.2英文名稱：2- nitro -3- methyl pyridine：8368-73-5分子量： C6H6N2O2

-氟萘分子式：46.6英文名稱：- f：32-38-0分子量： C0H7F