大鼠腎足突細(xì)胞說(shuō)明書

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠腎足突細(xì)胞說(shuō)明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠腎足突細(xì)胞【RatKidney:KidneyPodocytes】
    大鼠腎足突細(xì)胞說(shuō)明書 產(chǎn)品描述：腎足突細(xì)胞是附著在腎小球基底膜外的高度分化的上皮細(xì)胞。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30～40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4～6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過(guò)脈管系統(tǒng)的后屏障，對(duì)于維持腎小球?yàn)V過(guò)屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。公司提供的大鼠腎足突細(xì)胞采用膠原酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatKidneyPrimaCell™:NormalKidneyPodocytesCatNo.3-728)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠腎足突細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。?

A72(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

香菇 Lentinula edodes根瘤菌 Rhizobium sp.

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus球毛殼 Chaetomium globosum

苜蓿中華根瘤菌宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

生孢梭菌 Clostridium sporogenesNR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti桿菌屬 Lactobacillus sp.

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

H9c2大鼠心肌細(xì)胞（ATCC來(lái)源）TBS

大鼠腎足突細(xì)胞說(shuō)明書2-乙氧吡分子式：23.5英文名稱：2-, B：4529-53-4分子量： C7H9NO

3-氯-2-甲氧吡分子式：43.57英文名稱：3- chloride -2- a：3472-84-9分子量： C6H6ClNO

偏磷酸鉀分子式：8.07英文名稱：Potassium potassium phosphate：7790-53-6分子量： KO3P

二硼鈦分子式：69.49英文名稱：Titaniumdiboride：2045-63-5分子量： B2Ti

,2-二乙氧乙烷英文名稱：,2- two ethylene oxide分子式：8.7分子量： C6H4O2：629-4-

原花青素B2英文名稱：The original anthocyanin B2分子式：578.5234分子量：C30H26O2：2906-49-8

原花青素B3英文名稱：The original anthocyanin B3分子式：578.529分子量：C30H26O2：23567-23-9

3-酚英文名稱：3- amino phenol分子式：09.3分子量： C6H7NO：59-27-5

二甲酚橙英文名稱：Two xylenol orange分子式：76.62分子量： C3H32N2O3S:C3：6-35-4

硫酸鉀分子式：97.8英文名稱：Potassium thiocyanate：333-20-0分子量： KSCN

培養(yǎng)步驟：
大鼠腎足突細(xì)胞說(shuō)明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。