細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

食管鱗狀細(xì)胞癌；KYSE-140

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；KYSE 140; Kyse-140; KYSE140; Kyse140

種屬來源；人

組織來源；食管

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

STR位點；Amelogenin：X;CSF1PO：13;D2S1338：17;D3S1358：18;D5S818：10;D7S820：10,11;D8S1179：10;D13S317：12;D16S539：10,12;D18S51：14;D19S433：13,15;D21S11：29;FGA：22,23;PentaD：9;Pen

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein

IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein

FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽

CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ovarian cancer marker-CA125 CA125ELISA 人卵巢癌標(biāo)志物CA125檢測試劑盒

Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 人脫氧尿三0酸(DP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickenviruseeritis,DEV檢測試劑盒雞病毒性腸病毒(DEV)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

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小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 1   規(guī)格：      英文縮寫：   PAI-1

小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 2   規(guī)格：      英文縮寫：   PAI-2

小鼠松弛素   英文名稱：   Mouse Relaxin   規(guī)格：      英文縮寫：   RLN

大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)檢測試劑盒 ，英文名： PKCη ELISA Kit

N end middle Osteocalcin (N-MID-OT) ELISA Kit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)檢測試劑盒

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCXCR3(MouseCXC-chemokinereceptor3)ELISAKIT小鼠CXC趨化因子受體3

細(xì)胞色素P450亞酶CYP2E1(MFC)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠IX(FIX)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T