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人肝癌細(xì)胞+GFP;7721-coGFP-puro
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
人肝癌細(xì)胞+GFP;7721-coGFP-puro正在出售的產(chǎn)品：大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3 肝癌細(xì)胞，BEL-7404細(xì)胞 CEL細(xì)胞，雞胚原代肝細(xì)胞 JAR(人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞 豬腎細(xì)胞，LL-PK1細(xì)胞 Hs 578Bst(細(xì)胞)
人肝癌細(xì)胞+GFP;7721-coGFP-puro
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱；SMMC-7721-coGFP；人肝癌細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記
種屬來源；人
組織來源；肝臟
生長特性；貼壁生長
背景簡介；SMMC-7721-coGFP是在 SMMC-7721細(xì)胞上用慢病毒標(biāo)記上coGFP，可以顯示綠色熒光蛋白
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無
培養(yǎng)基；DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)檢測試劑盒 ，英文名： REG4 ELISA Kit
Mouse endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)檢測試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白
細(xì)胞ARG/ABL2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitC4a大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a
BLMH重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 Protein
AEG-1 peptide AEG-1抗原 0.5mgAEG-1 peptide AEG-1抗原
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
補(bǔ)體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein
TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein
人肝癌細(xì)胞+GFP;7721-coGFP-puro小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat coagulation factor III (F III) ELISA Kit 大鼠Ⅲ(FⅢ)檢測試劑盒
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit 人脂蛋白α(Lp-α)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBcellgrowthprotein,BCGF檢測試劑盒人B細(xì)胞生長因子(BCGF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物源性飼料玉米試劑盒20次
Humahioredoxin,xELISAKit人硫氧化還原蛋白(x)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
脫氧膽酸 10g
DeoxycholicAcid,SodiumSalt 50g
焦碳酸二乙脂 10ml
DEPC 100ml
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
